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  • 2019
    单克隆抗体亚型及结构、分子量
    单克隆抗体亚型及结构、分子量

    1.单克隆抗体主要有5种类型(IgA、IgD、IgE、IgG、IgM)。其中IgG型抗体因具有较长的体内半衰期并且能与人体免疫系统发生较强的相互作用。2.IgG相对分子量约为150KDa,IgA相对分子量约为160KDa,IgM相对分子量约为190KDa,IgD相对分子量约为184KDa,IgE相对分子量约为196KDa。

  • 2013
    单抗制备-细胞融合筛选过程中遇到的问题及对策

    1,融合率低,阳性孔少①免疫的问题。由于免疫原性不强或者免疫途径不当造成免疫弱,效价低。②融合过程中温度、时间、PEG分子量,作用时间等。③脾细胞是否取出了足够多的细胞,有无组织碎片干扰。④融合前骨髓瘤细胞生长状态是否完好,细胞是否浑圆,透亮,成对数生长。2,单抗亲和力整体低①免疫的问题。免疫途径不当或者免疫原问题。②融合细胞筛选过程出现遗漏,筛选方法不当或检测方法不当,造成没有筛到高亲和力的融合细胞。③由于亚克隆细胞生长环境不合适,导致融合细胞染色体丢失,分泌特性改变,亲和...

  • 2013
    骨髓瘤细胞SP2/0 培养过程中遇到的问题及对策

    1,细胞长的慢或细胞死亡正常生长情况下,细胞一天传代一次,生长越好,贴壁越多对策:①培养基配方不对;②接种密度太低,低于10的4次方;③污染了支原体或者其他不明细菌,支原体的现状是出现小黑点;细菌污染是浑浊;霉菌污染是出现白色肉眼可见菌落;不明细菌污染出现砂状平铺背景,视野发暗。④细胞瓶刷洗不干净2,细胞形态异常正常生长情况下,细胞浑圆,透亮,成对数生长,生长越好,贴壁多,悬浮少对策:①培养基配方不对;②接种密度太低,低于10的4次方;③污染了支原体或者其他不明细菌,支原体的...

  • 2013
    高亲和力单克隆抗体制备问题及对策

    一、单抗制备-骨髓瘤细胞SP2/0培养过程中遇到的问题及对策1,细胞长的慢或细胞死亡正常生长情况下,细胞一天传代一次,生长越好,贴壁越多对策:①培养基配方不对;②接种密度太低,低于10的4次方;③污染了支原体或者其他不明细菌,支原体的现状是出现小黑点;细菌污染是浑浊;霉菌污染是出现白色肉眼可见菌落;不明细菌污染出现砂状平铺背景,视野发暗。④细胞瓶刷洗不干净2,细胞形态异常正常生长情况下,细胞浑圆,透亮,成对数生长,生长越好,贴壁多,悬浮少对策:①培养基配方不对;②接种密度太低...

  • 2013
    单抗腹水制备过程中遇到的问题及对策

    1,腹水少或者无腹水产生①致敏不正确,不正确的使用致敏剂,或者致敏时间与接种杂交瘤的时间相差太久,一般是7-14天,具体看小鼠的腹部情况。②杂交瘤细胞或者致敏剂的接种位置不正确,没有打到腹腔,而是打到了皮下。③接种的杂交瘤细胞数量太少,太多或者细胞状态不好。一般不50万个细胞左右为宜。④建议使用母鼠或者生育过的母鼠制备腹水。2,腹水没有效价①制备腹水的杂交瘤极不稳定,打到小鼠身上之前就失去抗体分泌能力或者打到腹腔内就失去了分泌能力。②致敏小鼠时采用了错误的致敏剂。③接种的杂交...

  • 2012
    ELISA试剂盒使用及开发过程中常见问题及对策

    现象可能原因解决方法板条不显色或者无相应数值试剂使用顺序混乱,或操作步骤出错严格遵循实验说明重复实验使用了不同批次的试剂确保试剂来自同一试剂盒板条受潮严重板条要封好,干燥剂失效要及时更换低吸光度OD值试剂过期,或者不同的批次混用查证过期试剂和批次洗液配制错误、洗涤浸泡时间过长按照说明书要求洗涤,并正确配制洗液孵育时间过短按照说明书要求,严格计算好时间试剂污染确保吸取不同液体更换新的枪头和盛放器皿试剂温度过低根据试剂体积大小回温时间相应延长,确保试剂*回温使用错误波长读数,或者...

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