伏马毒素免疫亲和柱的试验原理及检测步骤

　　伏马毒素免疫亲和柱适用范围及性能:

　　用于定量检测谷物、酒类等食品和饲料等样本中的伏马毒素（FB）时的样品前处理。

　　伏马毒素免疫亲和柱的试验原理:

　　本产品净化的基础是抗原抗体反应，伏马毒素单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上，样品中的伏马毒素经过提取、过滤、稀释，然后将样品提取液缓慢通过，在免疫亲和柱内，伏马毒素与抗体结合，洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。后采用甲醇-乙酸洗脱伏马毒素，然后进行相关分析。

　　伏马毒素免疫亲和柱的检测步骤

　　l．样品制备

　　将固体样品按四分法缩分至1kg，全部用谷物粉碎机磨碎并磨细至粒度小于1mm,混匀分成2份作为试样，分别装入洁净的容器内，密封，标识后置于4℃下避光保存。玉米油样品直接取2份作为试样，分别装入洁净的容器内，密封，标识后置于4℃下避光保存。

　　2．试样提取

　　准确称取固体样品5g(精确至0.01g)于50mL离心管中，加入20mL乙腈-水溶液(50+50)，涡旋或振荡提取20min，取出后，在4000r/min下离心5min，将上清液转移至另一离心管中。玉米油样品操作同固体样品，提取液在下层。

　　3．试样净化

　　取2mL提取液，加入47mL吐温-20/PBS溶液，混合均匀后过免疫亲和柱，流速控制在1～3mL/min，用10mLPBS缓冲液淋洗免疫亲和柱，分别用1mL甲醇-乙酸溶液(98+2)洗脱免疫亲和柱三次，收集洗脱液，55℃下氮吹至干，加入1mL乙腈-水溶液(20+80)溶解残渣。涡旋30s，过0.45um微孔滤膜后，收集于进样瓶中，待测。

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