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伏马毒素免疫亲和柱的试验原理及检测步骤

 更新时间:2020-03-17    点击量:1516
   伏马毒素免疫亲和柱适合于和HPLC或LC-MS结合使用,定量检测FB1、FB2和FB3。适用于粮谷、饲料等样本中的伏马毒素净化处理,提高了样品的纯度,纯化后的提取液可用不同的分析方法测定
  伏马毒素免疫亲和柱适用范围及性能:
  用于定量检测谷物、酒类等食品和饲料等样本中的伏马毒素(FB)时的样品前处理。
  伏马毒素免疫亲和柱的试验原理:
  本产品净化的基础是抗原抗体反应,伏马毒素单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上,样品中的伏马毒素经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢通过,在免疫亲和柱内,伏马毒素与抗体结合,洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。后采用甲醇-乙酸洗脱伏马毒素,然后进行相关分析。
  伏马毒素免疫亲和柱的检测步骤
  l.样品制备
  将固体样品按四分法缩分至1kg,全部用谷物粉碎机磨碎并磨细至粒度小于1mm,混匀分成2份作为试样,分别装入洁净的容器内,密封,标识后置于4℃下避光保存。玉米油样品直接取2份作为试样,分别装入洁净的容器内,密封,标识后置于4℃下避光保存。
  2.试样提取
  准确称取固体样品5g(精确至0.01g)于50mL离心管中,加入20mL乙腈-水溶液(50+50),涡旋或振荡提取20min,取出后,在4000r/min下离心5min,将上清液转移至另一离心管中。玉米油样品操作同固体样品,提取液在下层。
  3.试样净化
  取2mL提取液,加入47mL吐温-20/PBS溶液,混合均匀后过免疫亲和柱,流速控制在1~3mL/min,用10mLPBS缓冲液淋洗免疫亲和柱,分别用1mL甲醇-乙酸溶液(98+2)洗脱免疫亲和柱三次,收集洗脱液,55℃下氮吹至干,加入1mL乙腈-水溶液(20+80)溶解残渣。涡旋30s,过0.45um微孔滤膜后,收集于进样瓶中,待测。
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