欢迎来到山东绿都生物科技有限公司网站!

0543-3202800
关键词搜索: 疫苗、兽药,食品安全检测抗原抗体试剂盒 、亲和柱、检测卡、生产原材料,动物疫病检测抗原抗体检测卡试剂盒
Product Center产品中心
首页 > 产品中心 > 食品安全检测  >  食品安全试剂盒  >  四环素类四环素类ELISA检测试剂盒

四环素类ELISA检测试剂盒

简要描述:四环素类ELISA检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样品中四环素类的残留量。
定量检测组织、蜂蜜、牛奶样本中四环素类残留。

  • 产品型号:四环素类
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2019-01-24
  • 访  问  量:872
详情介绍

一、原理

四环素类ELISA检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样品四环素类残留量。

二、适用范围

定量检测组织、蜂蜜、牛奶样本中四环素类残留。

三、四环素类ELISA检测试剂盒特点及技术指标

* 检 测 时 间 : 40min

  试剂盒灵敏度: 0.1ppb(µg/kg)

* 试剂盒检测纯阴性样本的背景值<1ppb;

* 样品直接稀释用于检测,结果准确;

* 试剂盒提供近工作浓度标准品,使用更方便。

试剂盒检测样本的灵敏度和准确度:

样本

检测下限

回收率

蜂蜜

3ppb

70%-120%

组织

4ppb

70%-120%

牛奶

0.1ppb

70%-120%

试剂盒特异性

药物名称

交叉反应率(%)

四环素

100%

       土霉素

82%

金霉素

73%

、所需材料

仪器微孔板酶标仪450 nm/630 nm均质器、振荡器离心机、天平(感量0.01 g)、离心管(5 mL, 50 mL)

微量移液器:单道 1µL~10 µL、10 µL~100µL

多道 50µL~300µL

试剂:去离子水

、 试剂盒组成

序号

组成部分

96T装量

1

四环素酶标板

12×8孔

2

50×四环素标准品*5

5×0.5mL

3

四环素类酶标物

7 mL

4

四环素类抗体

7mL

5

底物A液

7 mL

6

底物B液

7 mL

7

终 止 液

7 mL

8

20×浓缩洗涤液

40 mL

9

四环素标品稀释液

30mL

10

10×四环素样品稀释液

10mL

11

   10×四环素提取液

30mL

*注:A、B、C、D、E5个标准品浓度为:0 ppb, 5 ppb,15 ppb, 45ppb, 135ppb,稀释50倍使用,现配现用,配后避光放置并于半小时内使用,具体见溶液配制。

六、溶液配制

配液1: 洗涤工作液

用去离子水将20×浓缩洗涤液按1 : 19体积比进行稀释,用于酶标板的洗涤,洗涤工作液在4℃环境可保存一个月,用前一天取出回温。

配液2: 1×四环素样品稀释液

用去离子水将10×四环素样品稀释液按1: 9的体积比进行稀释,用于样本的稀释,1×四环素稀释液在4℃环境可保存一个月,用前一天取出回温。                                                         

配液3: 1×四环素提取液

  用去离子水将10×四环素提取液按1: 9的 体积比进行稀释,用于样本的提取,1×四环素提取液在室温环境可保存一个月。

配液4:  四环素工作浓度标准品

   50×四环素

      

四环素标品稀

释液

工作浓度标

准品

 0 ppb      10 µL

 +490 µL

0 ppb

 5 ppb      10 µL

 +490 µL

0.1 ppb

 15 ppb     10 µL

+490 µL

0.3 ppb

 45 ppb     10 µL

+490 µL

0.9 ppb

135 ppb    10 µL

+490 µL

2.7 ppb

七、样本前处理                                                   

样本处理前须知:

处理完的样品应及时进行下步检测,实验中必须使用一次性吸头,吸取不同试剂时要更换吸头。② 样本数目超过8个时推荐使用排枪加样。

(一)蜂蜜 (原蜜、成品蜜,稀释倍数:30)

① 称取样品1.0g ± 0.05g至7mL离心管中,加  入2mL 去离子水,震荡使其溶解(若浑浊需离心);

② 取出50μL清亮液体,加到450μL 去离子水中,混匀,取50μL直接用于分析。

(二)猪肉、鱼虾、鸡肉(稀释倍数:40)

① 称取样品1.0g ± 0.05g至50mL离心管中,加  入3mL  1×四环素提取液,震荡提取2-3min

② 4000rpm离心5min;

③ 取50μL上清液加到450μL1×四环素样品稀释液,混匀,取50μL用于分析。

(三)生鲜奶(稀释倍数:1)

  取新鲜无变质的生奶,取适量回温后直接用于分析

、 酶标免疫测定程序

  • 将所有所需试剂从冷藏环境中取出,待其*回升至室温后方可使用,根据体积大小不同取出回温的时间从1小时~3小时。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
  •  按标准品和样品双孔平行的数量使用微孔。
  •  加标准品/样品、酶、抗体:加标准品/样品50µL 到对应的微孔中,加入四环素类酶标物50µL /孔, 再加入四环素类抗体50µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应30min。
  •  洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,

加入洗涤工作液250 µL/孔,每次静置20s,甩去孔内液体,重复洗涤3次,后一次用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。

  •  显色:加入底物液A液50 µL/孔,再加底物    

液B液50 µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应10min。

  •  测定:加入终止液50µL/孔,用酶标仪立即  测定双波长450/630nm吸光度值。

、 结果判定

以标准品百分吸光率为纵坐标,以四环素类标准品浓度(ppb)的半对数为横坐标,绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中四环素类实际浓度。(详见试剂盒专业分析软件,以便进行大量样本的分析计算。)

、 注意事项

① 根据体积大小不同取出回温的时间从1小时~2小时,体积15毫升以上的先从冷藏环境取出回温。

② 50*四环素标品使用完毕后请及时放回冰箱避光保存。

反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。

不使用过了有效期的试剂盒,不交换使用不同批号的试剂。

⑤ 0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。

⑥ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色    时间为15min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到20min,反之则减短反应时间。

⑦ 底物液B液长期使用变为浅蓝色时,请放心使用,不影响检测结果。

未提及样本请致电本公司技术服务部。

十一贮藏条件及保存期

    贮藏条件: 28

保 质 期: 12个月

在线咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
扫一扫,关注微信
地址:山东省滨州市黄河二路169号 传真:86-0543-3405352
版权所有 © 2024 山东绿都生物科技有限公司  备案号: