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呕吐毒素ELISA检测试剂盒

型 号呕吐毒素

产品时间2019-01-24

所属分类食品安全试剂盒

报价2000

产品描述:呕吐毒素ELISA检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样品中呕吐毒素的残留量。定量检测粮食、饲料等样本中呕吐毒素残留。

产品概述

一、原理

呕吐毒素ELISA检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样品呕吐毒素残留量。

二、适用范围

定量检测粮食、饲料等样本中呕吐毒素残留。

三、呕吐毒素ELISA检测试剂盒特点及技术指标

* 检 测 时 间 : 30 min

  试剂盒灵敏度:5 ppb (µg/kg)

* 试剂盒检测纯阴性样本的背景值<2ppb

* 样品处理方法更加简洁,符合率大于90%

试剂盒检测样本的灵敏度和准确度:

样本

检测下限

回收率

粮食、饲料等

200ppb

70%-120%

 

试剂盒特异性

药物名称

交叉反应率(%)

呕吐毒素

100%

    玉米赤霉烯醇

< 1%

 

、所需材料

仪器微孔板酶标仪450 nm/630 nm均质器、振荡器离心机、天平(感量0.01 g)、离心管(5 mL, 50 mL)

微量移液器:单道 1µL~10 µL、10 µL~100µL

多道50µL~300µL

试剂:去离子水、甲醇

、 试剂盒组成

序号

组成部分

96T装量

1

呕吐毒素酶标板

12×8孔

2

呕吐毒素标准品*5

0.5-1 mL

3

呕吐毒素酶标物

7 mL

4

呕吐毒素抗体

7mL

5

底物A液

7 mL

6

底物B液

7 mL

7

终 止 液

7 mL

8

20×浓缩洗涤液

40 mL

9

2×呕吐毒素样品稀释液

40 mL

*注:A、B、C、D、E共5个标准品浓度为:0 ppb, 10 ppb, 30 ppb,90ppb, 270ppb, A、B标准品各1mL,其余各0.5mL,直接使用。

六、溶液配制

配液1: 洗涤工作液

用去离子水将20×浓缩洗涤液按1 : 19体积比进行稀释,用于酶标板的洗涤,洗涤工作液在4℃环境可保存一个月,用前一天取出回温。

配液2:  1×呕吐毒素样品稀释液     

用去离子水将2×呕吐毒素稀释液按1:1体积比进行稀释,用于样本的稀释,配好后在4℃环境可保存一个月,用前一天取出回温。

配液3:  样品提取液

将甲醇与去离子水按V:V=4:1 体积比配制成80%甲醇,即样品提取液。

七、样本前处理                                                   

样本处理前须知:

① 处理完的样品应及时进行下步检测,实验中必须使用一次性吸头,吸取不同试剂时要更换吸头。

② 样本数目超过8个时推荐使用排枪加样。

花生粕、猪育肥料、乳猪料、牛饲料、玉米、全麦(稀释倍数:20)

 称取样品1.0g ± 0.05g至离心管中,加入

10 mL样品提取液(配液3),震荡提取1min

② 4000rpm离心5min.;

③ 小心移取上清液500 μL 加到500 μL 1×呕吐毒素样品稀释液中, 混匀,取50 μL用于分析

、 酶标免疫测定程序

  • 将所需试剂从冷藏环境中取出,待其完全回  升至室温(20~25℃)后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
  •  按标准品和样品双孔平行的数量使用微孔。
  •  加标准品/样品、酶、抗体:加标准品/样品50µL 到对应的微孔中,加入呕吐毒素酶标物50µL /孔, 再加入呕吐毒素抗体50µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应20min。
  •  洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,

加入洗涤工作液250µL/孔,每次静置20s,甩去孔内液体,重复洗涤3次,后一次用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。

  •  显色:加入底物液A液50µL/孔,再加底物    

液B液50µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应10min。

  •  测定:加入终止液50µL/孔,用酶标仪立即  测定450nm处的吸光度值(建议用双波长450/630nm)检测。

、 结果判定

以标准品百分吸光率为纵坐标,以呕吐毒素标准品浓度(ppb)的半对数为横坐标,绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中呕吐毒素实际浓度。(详见试剂盒专业分析软件,以便进行大量样本的分析计算。)

、 注意事项

洗板拍干后应立即进行下一步操作

反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。

不使用过了有效期的试剂盒,不交换使用不同批号的试剂。

④ 0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。

⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色时间为10~15min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到20min,反之则减短反应时间。

 未提及样本请致电本公司技术服务部。

  • 贮藏条件及保存期

     贮藏条件: 2~8℃

保 质 期: 12个月

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