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氟苯尼考(Florfenicol)ELISA检测试剂盒

 更新时间:2019-01-29    点击量:1086
  酶标免疫测定程序
  • 将所有所需试剂从冷藏环境中取出,待其*回升至室温后方可使用,根据体积大小不同取出回温的时间从1小时~2小时。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
  •  按标准品和样品双孔平行的数量使用微孔。
  •  加标准品/样品、抗体:加标准品/样品50µL 到对应的微孔中,加入氟苯尼考抗体50µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应20min。
  •  洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,加入洗涤工作液300 µL/孔,每次静置20s,甩去孔内液体,重复洗涤3次,后一次用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
  • 加酶标物:加入氟苯尼考酶标物100 µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光孵育20 min。
  • 甩干孔内液体,重复洗板3次,后一次用吸水纸拍干。
  • 显色:加入底物液A液50 µL/孔,再加底物液B液50 µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应10min。
  • 测定:加入终止液50µL/孔,用酶标仪立即  测定450/630nm处的吸光度值。

  注意事项
  ① 根据体积大小不同取出回温的时间从1小时~3小时,体积15毫升以上的优先从冷藏环境取出 回温。
  ②  洗板拍干后应立即进行下一步操作。
  ③ 反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。
  ④不使用过了有效期的试剂盒,不交换使用不同批号的试剂。
  ⑤ 0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。
  ⑥ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色    时间为10min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到15-20min,反之则减短反应时间。
  ⑦ 底物液B液长期使用变为浅蓝色时,请放心使用,不影响检测结果。


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