血液RNA核酸免提取试剂盒

血液RNA核酸免提取试剂盒

试剂盒应用

本试剂盒采用特殊裂解液B从新鲜全血、抗凝血、血凝块中提取并纯化RNA。整个过程仅需要10分钟。采用硅基材质吸附柱，高效专一吸附RNA，保证提取高纯度、高产量RNA。该裂解液配方中含有RNA保护剂，能够抑制RNA降解、保护RNA完整，从而提高RNA产量。提取RNA可用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、分子克隆、文库构建等。

本试剂盒仅供研究使用，不可用于临床、食品、化妆品等领域。

试剂盒组成

备注：1、第一次使用前，在洗涤液BW2中加入48mL无水乙醇，并标记“√"和时间，避免重复加入。

保存条件

室温保存一年。

自备材料

水浴锅或金属浴、无水乙醇、1.5mL无RNase离心管、蛋白酶K（20mg/mL，或货号QR0301）、DNase I（2U/μL，或货号QR0102）

使用方法

1. 300μL血液（不足300μL，无菌PBS补齐）中加入500μL裂解液B和10μL蛋白酶K，颠倒混匀。

2. 55℃孵育2分钟。

备注：如果RNA提取量比较低，可延长孵育时间到10分钟。

3. 12,000rpm离心30秒。取750μL上清。

4. 加入0.5倍体积无水乙醇，上下颠倒混匀，

5. 全部加入RNA吸附柱中，12,000rpm离心30秒，倒掉收集管中废液。

6. 向RNA吸附柱中加入500μL洗涤液BW1，12,000rpm离心30秒，倒掉收集管中废液。

7. 向RNA吸附柱中加入500μL洗涤液BW2，12,000rpm离心30秒，倒掉收集管中废液。

8. 重复步骤7一次。

9. 12,000rpm离心2分钟，倒掉收集管中废液。

10. 将RNA吸附柱放入新1.5mL无RNase离心管中，加入30-50μL洗脱液B，室温放置1分钟。

11. 12,000rpm离心2分钟，得到RNA溶液，-80℃保存。

注意事项

1. 务必在超净台中进行操作，常换手套，防止RNA降解。

2. 尽可能使用新鲜样本进行RNA提取。

3. 使用无DNase无RNase的吸头和离心管，防止RNA降解，常更换吸头，防止交叉污染。

4. 为了提高洗脱效率，可提前将洗脱液B置于65℃水浴后再使用。

5. 根据后续试验需求，请使用DNase I（货号QR0102）进行基因组清除。

常见问题解析