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Nu-P01植物组织PCR试剂盒(免核酸提取)

简要描述:本试剂盒适用于烟草、拟南芥、水稻、大豆、油菜、玉米、小麦等叶片和种子的PCR、荧光定量PCR 检测。使用该试剂盒无需液氮研磨,无需使用有机试剂,无需重复离心便可获得用于PCR反应的基因组模板。
依托Nu-Smart®平台DNA-Lysis采用zhu利配方,5分钟内获得花瓣、花蕊、种子、叶片、根、茎等样本的基因组DNA。叶片仅仅需取材1-4mm,取样量小,减少对样品的损耗。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-04-27
  • 访  问  量:320
详情介绍

NuSmart®植物组织PCR试剂盒

(免核酸提取)

试剂盒应用

本试剂盒适用于烟草、拟南芥、水稻、大豆、油菜、玉米、小麦等叶片和种子的PCR、荧光定量PCR 检测。使用该试剂盒无需液氮研磨,无需使用有机试剂,无需重复离心便可获得用于PCR反应的基因组模板。

依托Nu-Smart®平台DNA-Lysis采用zhuan利配方,5分钟内获得花瓣、花蕊、种子、叶片、根、茎等样本的基因组DNA。叶片仅仅需取材1-4mm,取样量小,减少对样品的损耗。

预制的2×TaqMix (With Dye)只需要加入引物和模板DNA即可进行PCR反应,减少移液次数,实现高通量扩增。该体系中添加有电泳缓冲液和染料,PCR结束后直接进行琼脂糖凝胶电泳,使用方便快捷。

本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等领域。

 

试剂盒组成

组分

Nu-P010150T

Nu-P0102250T

DNA-Lysis

1 mL

5 mL

2×TaqMix (With Dye)

500 μL

2×1.25mL

 

保存条件

-20ºC保存。

使用前将DNA-Lysis室温充分混匀,经常使用可4℃保存。

2×TaqMix (With Dye)溶解后需置于冰上,避免反复冻融。

 

需要准备

金属恒温浴、PCR

 

使用方法

一、不同样品的处理方法

1. 叶片的处理

1)用眼科剪或叶片取样器剪取1-4mm叶片

2加入20 μL DNA-Lysis

3充分混匀。

4置于55℃作用5分钟溶液即为DNA模板。

 

2. 种子和果实的处理

1研磨后种子或1-2mm果肉放入离心管中。

2加入20 μL DNA-Lysis

3充分混匀。

4置于55℃作用5分钟

510,000rpm离心1分钟,上清即为DNA模板。

 

二、推荐PCR反应体系


20 μL体系(推荐)

50 μL体系

2×TaqMix (With Dye)

10 μL

25 μL

引物1 (10 μM)

1 μL

2 μL

引物2 (10 μM)

1 μL

2 μL

DNA模板

0.5-2 μL

0.5-3 μL

ddH2O

补足至20 μL

补足至50 μL

※:引物浓度可以在0.1-0.5 μM范围内进行调节。

 

三、按照以下方法设定PCR反应

步骤

温度

时间

循环数

预变性

95 oC

5 min

1

变性

95 oC

15-30 s

 

35-40

退火

50~72 oC

30 s

延伸

72 oC

1 kb/min

彻di延伸

72 oC

5 min

1


4 oC

Hold

1

 

注意事项

一、试剂盒使用前注意事项

1)所有试剂应按照zhi定温度储存。请勿反复冻融。

2)使用前后均需要对操作区进行消毒,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除剂等。耗材均需使用商品化的无酶耗材。

3DNA-Lysis频繁使用,可在4℃保存。长期不使用可放-20℃保存。

二、样本注意事项

(1)不同叶片使用不同的取样器进行处理,防止交叉污染导致检测结果偏差。

(2)叶片剪取不宜过大,以1-4mm为宜。

(3)种子样本大小不一,建议研磨后使用。

三、试剂盒使用过程中注意事项

(1)PCR过程中推荐使用阴性对照和阳性对照。

(2)整个过程中使用的吸头、离心管等耗材应丢弃在含有75%乙醇或核酸消除剂的容器中,减少环境污染。

(3)2×TaqMix (With Dye)包含染料,可在反应结束后直接进行琼脂糖凝胶电泳。

(4)不能使用其他品牌的taq酶,进行PCR扩增检测。

四、试剂盒使用后注意事项

(1)DNA-Lysis处理后的DNA模板可在-20℃保存至少1个月,如需长期保存,可离心后取上清置-80℃保存。避免反复冻融,防止基因组断裂。

(2)PCR反应完成后,严禁在实验区开盖。应在污染区进行琼脂糖凝胶电泳,防止气溶胶污染。

(3)为防止试剂盒污染,请勿将不同批号试剂盒混用。


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