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RNA核酸免提取试剂盒

简要描述:RNA核酸免提取试剂盒

试剂盒应用
本试剂盒采用zhuan利裂解液配方,有针对性的从组织、培养细胞、拭子、血液、尿液、唾液、环境样本中获得病毒RNA。裂解、提取和纯化只需10分钟。该配方中添加RNA保护剂,能够抑制RNA降解、保护RNA完整,从而提高RNA产量。提取后的RNA可直接用于RT-PCR、RT-qPCR、分子克隆、文库构建等实验。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-04-27
  • 访  问  量:490
详情介绍

RNA核酸免提取试剂盒

 

试剂盒应用

本试剂盒采用zhuan利裂解液配方,有针对性的从组织、培养细胞、拭子、血液、尿液、唾液、环境样本中获得病毒RNA。裂解、提取和纯化只需10分钟。该配方中添加RNA保护剂,能够抑制RNA降解、保护RNA完整,从而提高RNA产量提取后的RNA可直接用于RT-PCRRT-qPCR分子克隆、文库构建实验。

本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等领域。

 

试剂盒组成

组分

Col-R050250T

编号

裂解液VR

35 mL

Col-R0502A

洗涤液VRI

25 mL

Col-R0502B

洗涤液VRII

12 mL

Col-R0502C

洗脱液VR

5 mL


RNA吸附柱

50

Col-R0502E

备注:第一次使用前,在洗涤液VRII中加入48mL无水乙醇,并标记"和时间,避免重复加入。

 

保存条件

室温保存一年

 

自备材料

水浴锅或金属浴、无水乙醇1.5mLRNase离心管

 

使用方法

1. 样本处理方法

1.1 从动物组织中提取

1.1.1 20-100mg组织样本放入液氮中充分研磨,加入700μL裂解液VR颠倒混匀。

或者20-100mg组织样本加入700μL裂解液VR,加入1颗钢珠,放入组织研磨器中,研磨1-2分钟。

1.1.2 55℃孵育1分钟。12,000rpm离心1分钟。

1.1.3 500μL上清加入250μL无水乙醇,充分混匀。按照步骤2.1-2.7进行操作。

 

1.2 从悬浮细胞中提取

1.2.1 细胞1,000rpm离心5分钟,收集细胞沉淀。

1.2.2 细胞数量<5×106时,加入500μL裂解液DV。细胞数量为5×106~1×107时,加入700μL裂解液VR。轻轻吹打混匀,55℃孵育1分钟。

1.2.3 12,000rpm离心1分钟。

1.2.4 细胞数量<5×106时,450μL上清。细胞数量为5×106~1×107时,650μL上清。

1.2.5 加入0.5倍体积无水乙醇,充分混匀。按照步骤2.1-2.7操作。

 

1.3 从贴壁细胞中提取

1.3.1 yimei消化细胞后1,000rpm离心5分钟,收集细胞沉淀。

1.3.2 细胞数量<5×106时,加入500μL裂解液DV。细胞数量为5×106~1×107时,加入700μL裂解液VR。轻轻吹打混匀,55℃孵育1分钟。

1.3.3 12,000rpm离心1分钟。

1.3.4 细胞数量<5×106时,450μL上清。细胞数量为5×106~1×107时,650μL上清。

1.3.5 加入0.5倍体积无水乙醇,充分混匀。按照步骤2.1-2.7操作。

 

1.4 从血液、尿液、唾液、细胞上清液中提取

1.4.1 300μL样本中加入500μL裂解液VR。颠倒混匀,55℃孵育1分钟

1.4.2 加入400μL无水乙醇,上下颠倒混匀。按照步骤2.1-2.7操作。

 

1.5 从拭子中提取

1.5.1 拭子置于700μL裂解液VR中,颠倒混匀,55℃孵育1分钟。

1.5.2 加入350μL无水乙醇,上下颠倒混匀。按照步骤2.1-2.7操作。

 

2. 提取步骤

2.1 1全部加入RNA吸附柱中(如有需要可离心两次)12,000rpm离心1分钟,倒掉收集管中废液。

2.2 RNA吸附柱中加入500μL洗涤液VRI12,000rpm离心30秒,倒掉收集管中废液。

2.3 RNA吸附柱中加入500μL洗涤液VRII12,000rpm离心30秒,倒掉收集管中废液。

2.4 重复步骤2.3一次。

2.5 12,000rpm离心2分钟,倒掉收集管中废液。

2.6 RNA吸附柱放入新1.5mLRNase离心管中,加入30-50μL洗脱液VR,室温放置1分钟。     

2.7 12,000rpm离心2分钟,得到RNA溶液,-80℃保存。

 

注意事项

1、务必在超净台中进行操作,常换手套,防止RNA降解。

2、尽可能使用新鲜样本进行RNA提取。

3、使用无DNaseRNase的吸头和离心管,防止RNA降解,常更换吸头,防止交叉污染。

4、为了提高洗脱效率,可提前将洗脱液VR置于65℃水浴后再使用。

 

 


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