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0543-3202800一、产品用途:
赭曲霉毒素(OTA)免疫层析亲和柱可选择性吸附样品提取液中的赭曲霉毒素,从而对样品液中的赭曲霉毒素起到非常针对性的纯化作用,过柱纯化后的样品液纯度被提高,可用于不同分析方法的测定。
二、产品概述:
赭曲霉毒素是一类真菌(如赭曲霉和纯绿青霉)的有毒性的代谢产物,这类产毒素的真菌广泛生栖在粮食及某些青干饲草中,产生毒素。动物食用被其污染的原料生产的饲料,可引起中毒。OTA对食品污染的范围较广,包括谷物、豆类、葡萄干、啤酒和葡萄汁等。
三、反应原理:
赭曲霉毒素(OTA)免疫层析亲和柱测定的原理是抗原抗体反应。赭曲霉毒素单克隆抗体固定于柱内凝胶上,样品中的赭曲霉毒素经过提取、过滤、稀释,然后缓慢通过赭曲霉毒素免疫亲和柱,在柱内赭曲霉毒素与抗体特异性结合,之后洗涤免疫亲和柱,除去未结合的其他物质。用乙酸甲醇洗脱赭曲霉毒素,注入到分析仪器中进行检测。
四、产品包装组成:
每盒中包含25支赭曲霉毒素免疫亲和柱及1套相应说明书。
五、IAC性能:
2、交叉反应率
六、注意事项:
赭曲霉毒素 | 100% |
玉米赤霉烯醇 | 1% |
1、赭曲霉毒素对人体有害,应戴手套操作。
2、使用过的玻璃容器及赭曲霉毒素溶液用5%浓度的次氯酸钠溶液浸泡过夜。
3、不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
4、免疫亲和柱不使用时要2-8℃保存,不可冻存。
5、使用前,免疫亲和柱需回至室温(22-25℃)。
6、取样量:根据实际情况可以适当增减,但不可太少,同时提取液体积要按比例随之改变。
7、pH:上柱液pH要在6~8之间,若偏离此范围需用盐酸或氢氧化钠调节pH。
七、需要的材料但盒中不提供:
设备 | 器皿耗材 | 试剂 |
HPLC 泵流操作架 高速均质器高速粉碎机 | 量筒(50/200mL) 漏斗 收集瓶 容量瓶(100mL/1L) 微量移液器:单道 定量滤纸 玻璃微纤维滤纸 离心管(50mL) | 乙酸 甲醇 蒸馏水 OTA标准品 |
八、试剂配制:
1、提取液:甲醇-水(8:2)
移取800mL甲醇,加一级水200mL混合。
2、磷酸盐缓冲溶液(以下简称PBS):称取8.00g氯化钠,1.20g磷酸氢二钠,0.20g磷酸二氢钾,0.20gkcl,用900mL蒸馏水溶解,然后用盐酸调节pH值至7.4,后用蒸馏水稀释定容至1000mL。
3、洗脱液:2%乙酸甲醇
移取2mL乙酸,加98mL甲醇混合。
柱容量 | 100ng |
赭曲霉毒素 | >90% ±5% |
九、样品处理:真菌毒素分析的大误差来源是样品的收集和取样过程,所以要保证样品收集和取样的代表性。
(一)一般固体样品
1、称取5g试样(精确到0.01g)于50ml离心管中;
2、加20.0mL提取液,涡旋混匀,置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20min(或高速均质3min);
3、在5000r/min下离心10min(或均质后用玻璃纤维滤纸过滤至澄清);
4、取滤液4ml,加入24ml PBS,混匀(如混浊,请用玻璃纤维滤纸过滤至澄清)
(二)植物油脂
1、称取5g试样(精确到0.01g)于50ml离心管中;
2、加20.0mL提取液,涡旋混匀,置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20min(或高速均质3min);
3、5000r/min离心10min,取上清液备用;
4、取滤液4ml,加入24ml PBS溶液,混匀,(如混浊,请用玻璃纤维滤纸过滤至澄清)
(三)酱油、食醋、咖啡、酒类
1、称取5g试样(精确到0.01g)于50ml离心管中;
2、用甲醇定容至25ml(精确至0.1mL),涡旋混匀,置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20min(或高速均质3min)
3、在5000r/min下离心10min(或均质后用玻璃纤维滤纸过滤至澄清);
4、取滤液4ml,加入,加入24ml PBS溶液,混匀,(如混浊,请用玻璃纤维滤纸过滤至澄清)
十、操作程序:符合国标GB 5009.96-2016
1、连接:将免疫亲和柱后盖取下,用剪刀剪开,重新盖上,连接于泵流操作架的30mL注射器下;
2、上样:移取上述提取液移至注射器内,打开下端堵头;
3、富集:将空气压力泵与注射器连接,调节压力使样品提取液缓慢通过免疫亲和柱,建议重力过柱;
4、洗涤:用20mL蒸馏水分两次加压清洗,弃去全部流出液,并使2-3mL空气通过柱体;
5、洗脱:为保证洗脱充分,以2ml 2%乙酸甲醇进行洗脱,重力洗脱即可。首先,将免疫亲和柱内液 体排干,加1.0mL乙酸甲醇于柱管内,重力过柱,当溶剂通过柱子后;再加入1.0mL乙酸甲醇重复上述洗脱步骤,后轻微加压排净洗脱液,合并洗脱液,将洗脱液浓缩吹干,用1mL流动相复溶,涡旋30s溶解残余物,0.22μm滤膜过滤,待测。
十一、操作流程图示
A | B | C | D | E | |||
|
针筒注射器
提取液
过柱 |
泵流加压 |
|
色谱甲醇
|
HPLC | ||
产品信息:
产品名称:赭曲霉毒素免疫亲和柱
产品货号: LD-004
产品描述:赭曲霉毒素单克隆抗体
包装单位:25支/盒
储存条件:2~8℃,切勿冷冻
保质期:18个月
本公司可提供的真菌毒素检测产品
类型 | 产品名称 |
ELISA酶联 免疫试剂盒 | 黄曲霉毒素总量(AFT) |
黄曲霉毒素B1(AFB1) | |
黄曲霉毒素M1(AFM1) | |
呕吐毒素(DON) | |
玉米赤霉烯酮(ZEN) | |
伏马毒素(FUM) | |
T-2毒素(T-2) | |
赭曲霉毒素(OTA) | |
免疫亲和柱 | 黄曲霉毒素总量(AFT) |
黄曲霉毒素B1(AFB1) | |
黄曲霉毒素M1(AFM1) | |
呕吐毒素(DON) | |
玉米赤霉烯酮(ZEN) | |
伏马毒素(FUM) | |
T-2毒素(T-2) | |
赭曲霉毒素(OTA) | |
真菌毒素三合一(B1、ZEN、DON)免疫亲和柱 | |
可定制多毒素复合免疫亲和柱 | |
胶体金快速 检测卡 | 黄曲霉毒素总量(AFT) |
黄曲霉毒素B1(AFB1) | |
黄曲霉毒素M1(AFM1) | |
呕吐毒素(DON) | |
玉米赤霉烯酮(ZEN) | |
伏马毒素(FUM) | |
T-2毒素(T-2) | |
赭曲霉毒素(OTA) |