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你想要的鼠抗重金属类单克隆抗体上线了!

点击次数:510次  发布时间:2020-07-07
   重金属是一类很重要的污染物,在生物体内长期积累不可降解,极其微量的情况下也会产生不良后果。重金属通过食物链蓄积到人体中,可引起各种疾病甚至癌症,其危害还能遗传到下一代。
  为了利用抗体库筛选技术制备检测重金属铬的单克隆抗体,本鼠抗重金属类单克隆抗体研究利用整合剂DTPA成功制备了重金属Cr的*抗原,并利用制备的*抗原结合噬菌体展示技术成功筛选到了特异性识别Cr-DTPA的噬菌体抗体Cr-DTPA-VHH4-63。结果显示,获得的抗体亲和常数为1.279x10"L/mol,与载体蛋白BSA/OVA及无金属抗原DTPA-BSA/0VA均无交叉反应,与其他金属离子也没有交叉反应,特异性强。利用制备的Cr-DTPA噬菌体抗体初步建立了ELISA免疫检测法,其方法低检测限达到1ug/L,水样加标回收试验平均回收率90%-114%6,达到国家饮用水检测标准,可用于农业淄溉用水及生活饮用水中的重金属铬的检测。
  本鼠抗重金属类单克隆抗体研究以谷胱甘肽(GSH)作为双功能螯合剂偶联Hg2+和匙孔血蓝蛋白(KLH),获得*抗原KLH-GSH-Hg2+。用该抗原在佐剂的辅助下免疫BALB/C小鼠。免疫5次后,用间接ELISA方法检测免疫小鼠抗血清,含Hg2+抗原(BSA-GSH-Hg2+)检测OD值远大于无Hg2+抗原(BSA-GSH)。此后经过细胞融合、杂交瘤筛选以及克隆化等步骤,建立了稳定分泌抗重金属Hg2+的单克隆抗体的杂交瘤细胞株2C3,后用小鼠体内诱生法生产抗Hg2+腹水型单抗,其效价为1:51200。
 
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