猪瘟病毒属于RNA病毒，荧光RT‑PCR（实时荧光逆转录聚合酶链式反应）集成逆转录、PCR扩增与荧光信号实时检测，大多采用TaqMan探针法，用于检测样本中猪瘟病毒RNA。第一步为逆转录反应。提取样品中的总RNA，在逆转录酶作用下，以猪瘟病毒RNA为模板，依靠特异性引物合成互补的cDNA。RNA本身不能直接作为PCR扩增模板，逆转录环节就是将病毒RNA转化为稳定的DNA模板。第二步为PCR扩增与荧光信号释放。反应体系内加入一对猪瘟特异性引物以及一条荧光探针。探针5端标记报告荧...

赭曲霉毒素免疫亲和柱是食品、粮油、饲料中赭曲霉毒素检测的核心净化耗材，依靠抗原抗体特异性结合实现毒素富集与杂质去除，回收率是判定检测数据准确、实验合规的核心指标。实操中常出现回收率偏低、数据不稳定、平行样差异大等问题，主要源于样品前处理不规范、上样净化参数失控、柱子性能异常、基质干扰与操作损耗五大类问题。本文结合赭曲霉毒素免疫亲和柱的标准实验流程，系统梳理成因与解决方案。一、样品提取不充分，初始毒素残留损失提取环节是回收率偏低的源头问题。提取溶剂配比不当、均质振荡时间不足、提...

猪瘟病毒属于RNA病毒，荧光RT‑PCR检测包含核酸提取、反转录、荧光扩增全过程，实验极易发生RNA降解、样本交叉污染、扩增产物气溶胶污染，直接造成假阳性、假阴性结果，需要严格执行分子生物学实验室操作规范，同时做好生物安全管控。一、实验室分区与防污染要求严格执行PCR三区物理隔离，分为试剂配制区、样本核酸处理区、扩增检测区，各区仪器、移液器、枪头、离心管、工作服手套专用，物品禁止跨区域流动，实验流程单向进行，由试剂配制区流向扩增区，严禁反向操作。各工作区域定期开展台面消杀，使...

农残检测是食品安全与农产品质量管控的核心环节，鼠抗农残类单克隆抗体凭借特异性强、灵敏度高、检测便捷的优势，被广泛应用于各类农药残留快速筛查场景。由于多数农药小分子不具备免疫原性，无法直接诱导机体产生抗体，需通过人工设计免疫原并结合杂交瘤技术制备特异性单抗。本文梳理鼠抗农残类单克隆抗体的标准化制备技术，同时总结核心免疫原设计要点，为农残免疫检测试剂研发提供技术参考。一、人工免疫原设计核心要点农药小分子属于半抗原，仅具备反应原性，无免疫原性，需结合载体蛋白构建免疫原。在结构设计中...

口蹄疫病毒存在结构蛋白（SP）与非结构蛋白（NSP）。疫苗生产过程经过病毒灭活提纯，成品疫苗基本去除非结构蛋白；动物仅接种灭活疫苗，体内一般不会产生非结构蛋白抗体。只有动物发生自然感染，病毒在体内复制合成非结构蛋白，机体才会生成对应的非结构蛋白抗体，这也是该检测区分疫苗免疫动物与野毒感染动物的核心基础。该方法常用竞争ELISA或间接ELISA模式，主流为间接ELISA，原理流程如下：抗原包被：将纯化的口蹄疫病毒重组非结构蛋白（常选用3ABC蛋白）作为固相抗原，吸附在酶标板微孔...