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抗乳铁蛋白单克隆抗体的特异性是什么?

 更新时间:2020-10-27    点击量:722
   抗体是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。
  乳铁蛋白是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白,中性粒细胞颗粒中具有杀菌活性的单体糖蛋白。主要由乳腺上皮细胞表达和分泌。
  抗乳铁蛋白单克隆抗体对由第1单克隆抗体和第二单克隆抗体组成,所述第1单克隆抗体由保藏的杂交瘤细胞株分泌得到,所述第二单克隆抗体由保藏的杂交瘤细胞株分泌得到。本发明还提供了如上所述的人乳铁蛋白单克隆抗体对在制备检测人乳铁蛋白的试剂盒中的用途。通过上述技术方案,本发明能够通过双抗夹心免疫试纸检测方法,对人乳铁蛋白的检测取得的灵敏度,对牛乳铁蛋白和羊乳铁蛋白不呈现交叉反应,并且对人溶菌酶转基因牛、人α‑乳清白蛋白转基因牛不呈现交叉反应,具有较高的敏感度和特异性。
  抗乳铁蛋白单克隆抗体的特异性:抗乳铁蛋白单克隆抗体和人转铁蛋白没有交叉反应,但是单克隆抗体和人转铁蛋白交叉反应微弱。
  单克隆抗体制备的基本过程如下:
  (1)用抗原免疫小鼠;
  (2)从抗原免疫过的小鼠获取脾细胞;
  (3)应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞。这种细胞不仅能够像B淋巴细胞一样合成性质稳定的转移性抗体,而且能够像骨髓瘤细胞一样无限复制,这样就可以产生大量且性质专一的鼠源抗体;
  (4)对获得的杂交瘤细胞进行筛选,选出能分泌高效价抗体的杂交瘤;
  (5)对已筛选出的单个细胞进行鉴定和克隆。
  杂交瘤产生的单克隆抗体在各个领域中应用越来越广,有很大的优点和潜力。能够根据需要进行研发生产,可建立稳定的细胞株持续供给应用,相比于抗血清能够减少大量的动物和费用,而且纯度高,均一性好,可作为一种标准试剂。
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