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禽白血病病毒抗原ELISA批量净化检测试剂盒

型 号

产品时间2022-04-07

所属分类动物疫病试剂盒

报价

产品描述:禽白血病病毒抗原ELISA批量净化检测试剂盒用途
批量检测蛋清、泄殖腔式子、肝脏、病毒培养液等一批中禽白血病病毒,检测结果可用于ALV感染的辅助诊断。

产品概述

一、禽白血病病毒抗原ELISA批量净化检测试剂盒原理

本试剂盒采用直接竞争ELISA方法批量检测禽白血病病毒抗原

二、用途

批量检测蛋清、泄殖腔式子、肝脏、病毒培养液等一批中禽白血病病毒,检测结果可用于ALV感染的辅助诊断。

三、禽白血病病毒抗原ELISA批量净化检测试剂盒所需材料

仪器微孔板酶标仪450 nm/630 nm振荡器离心机、、离心管(5 mL, 50 mL

微量移液器:单道 1µL10 µL10 µL100µL

多道 50µL300µL

试剂:去离子水

五、 试剂盒组成

序号

组成部分

96T装量

1

阳性对照酶标板

961-5

2

阳性对照

2mL

3

酶标物

13 mL

4

底物A

7 mL

5

底物B

7 mL

6

终 止 液

7 mL

7

20×浓缩洗涤液

40 mL

8

2×样品稀释液

40 mL

六、溶液配制

配液1: 洗涤工作液

  用去离子水将20×浓缩洗涤液按1 : 19体积比进行稀释,用于酶标板的洗涤,洗涤工作液在4℃环境可保存一个月,用前一天取出回温。

配液2: 1 ×样品稀释液      

  用去离子水将2 ×样品稀释液按1:1体积比进行稀释配好1 ×样品稀释液4℃环境可保存一个月,用前一天取出回温。

七、样本前处理                                                  

样本处理前须知:

① 处理完的样品应及时进行下步检测,实验中必须使用一次性吸头,吸取不同试剂时要更换吸头。

② 样本数目超过8个时推荐使用排枪加样。

样本处理:

蛋清取全蛋,破碎后取蛋清,,-20℃以下冻融1次,用微量移液器吸取蛋清直接进行检测。

泄殖腔拭子用无菌棉签于待检鸡只泄殖腔取样后,放入0.5ml 1×样品稀释液中,置-20℃以下冻融1次,剧烈震荡1分钟,挤出棉签中的液体,弃棉签。以5000r/min离心5分钟,取上清直接进行检测。

病毒培养液,取病毒培养液以8000r/min离心10分钟,取上清直接进行检测。

④肝脏等组织,取约2g加入0.5ml 1×样品稀释液,研磨破碎,置-20℃以下冻融1次,以5000r/min离心5分钟,取上清直接进行检测。

酶标免疫测定程序

①将所有所需试剂从冷藏环境中取出,待其完全回升至室温(20~25)后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

② 按阳性对照和样品双孔平行的数量使用微孔。


包被板上对照品和待测样品添加如下所示:


1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

N

S1

S2

S3

S4








B

N












C

P












D

P












E













F













G













H













(注:P表示阳性对照品;N表示阴性对照品;S1S2S3S4等表示待检样品)


③加入处理好的待检样品,100µL/孔,同时设阴、阳性对照品(各2),轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37避光环境中反应30min

④洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,加入洗涤工作液300 µL/孔,每次静置20s,甩去孔内液体,重复洗涤3次,最后一次用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。

⑤加酶标物:加入酶标物100 µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37避光孵育30 min

.甩干孔内液体,重复洗板3次,最后一次用吸水纸拍干。

⑦显色:加入底物液A50 µL/孔,再加底物液B50 µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37避光环境中反应10min

测定:加入终止液50µL/孔,用酶标仪立即  测定450nm处的吸光度值。

九、 结果判定

试验结果满足有效的前提条件是:阳性对照品孔的平均OD450nm>0.20,阴性对照品孔的平均OD450nm<0.10

S/P=   检测样品平均OD450nm/ 阳性对照品孔的平均OD450nm

S/P 0.2时,判定为阳性样品,数值越大,阳性越强;检测样品0.1 S/P <0.2时,判定为可疑样品,建议一周后重测; 检测样品OD450nm<0.1时为阴性样品。

、 注意事项

本品仅供体外检测使用。

样本前处理完毕后以及洗板拍干后应立即进行下一步操作

反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。

不使用过了有效期的试剂盒,不交换使用不同批号的试剂。试剂盒中的各种液体试剂使用前应充分摇匀,平衡至室温。

⑤包被板拆封后未使用,应放回铝箔袋并封口,28保存,应避免受潮,试剂盒使用完毕后应在28下保存。

应严格按照试剂盒说明书进行操作,严格遵循各操作步骤规定的时间和温度。

未提及问题请致电本公司技术服务部。

十一贮藏条件及保存期

   贮藏条件: 28

保 质 期: 6个月


仅供兽医诊断使用

长期提供原核、真核蛋白表达构建服务

长期 提供抗原偶联、 HRP、生物素、糖基化、亲和素、FITC等偶联标记多肽、抗体、抗原、蛋白等服务


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