欢迎来到山东蓝都生物科技有限公司网站!
0543-3202800一、产品用途:
呕吐毒素(DON)免疫层析亲和柱可选择性吸附样品提取液中的呕吐毒素,从而对样品液中的呕吐毒素起到非常针对性的纯化作用,过柱纯化后的样品液纯度被提高,可用于不同分析方法的测定。
二、产品概述:
呕吐毒素主要污染小麦、大麦、玉米等谷类作物,也污染粮食制品,人和动物在误食被该毒素污染的粮谷类后可以产生广泛的毒性效应。它还常与其它的霉菌毒素如黄曲霉毒素共同污染农作物,进入人体后可以相互影响,对人类及动物的健康构成威胁。DON属于剧毒或中等毒物,在体内可能有一定的蓄积,但无特殊的靶器官,具有很强的细胞毒性。
三、反应原理:
呕吐毒素(DON)免疫层析亲和柱测定的原理是抗原、抗体反应,抗体连接在柱体内,样品经过提取、过滤后,缓慢的通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫亲和柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇洗脱脱氧雪腐镰刀菌烯醇,经氮气吹干复溶后注入到分析仪器中用于检测。
四、产品包装组成:
每盒中包含25支黄曲霉毒素B1免疫亲和柱及1套相应说明书。
五、IAC性能:
1、性能参数
柱容量 | 2000ng |
呕吐毒素 | >90% ±5% |
2、交叉反应率
呕吐毒素 | 100% |
玉米赤霉烯醇 | 1% |
六、注意事项:
1、呕吐毒素可致癌,应戴手套口罩等防护工具操作。
2、使用过的玻璃容器及黄曲霉毒素溶液用5%浓度的次氯酸钠溶液浸泡过夜。
3、不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
4、免疫亲和柱不使用时要2-8℃保存,不可冻存。
5、使用前,免疫亲和柱需回至室温(22-25℃)。
6、取样量:根据实际情况可以适当增减,但不可太少,同时提取液体积要按比例随之改变。
7、pH:上柱液pH要在6~8之间,若偏离此范围需用盐酸或氢氧化钠调节pH。
七、需要的材料但盒中不提供:
设备 | 器皿耗材 | 试剂 |
HPLC 泵流操作架 高速均质器高速粉碎机 | 量筒(50/200mL) 漏斗 收集瓶 容量瓶(100mL/1L) 微量移液器:单道 定量滤纸 玻璃微纤维滤纸 离心管(50mL) | 色谱级甲醇 蒸馏水 乙腈 DON标准品 |
八、试剂配制:
1、磷酸盐缓冲溶液(以下简称PBS):称取8.00g氯化钠,1.20g磷酸氢二钠,0.20g磷酸二氢钾,0.20gkcl,用900mL蒸馏水溶解,然后用盐酸调节pH值至7.4,后用蒸馏水稀释定容至1000mL。
2、乙腈-水(8+2):取800mL 乙腈,加入200mL 去离子水。
九、样品处理:真菌毒素分析的大误差来源是样品的收集和取样过程,所以要保证样品收集和取样的代表性。
(一)玉米、小麦、面粉、配合饲料、浓缩料、精补料等吸水性较小的样本(稀释倍数:2倍)
1、5g±0.01g 样品(固体样品需粉碎,并过1mm 分样筛),20mL 水;
2、高速均质1min,或用摇床200r/min~300r/min 剧烈振荡20min;
3、5000r/min离心10min,取上清液备用;
4、取4mL 上样液过免疫亲和柱净化。
(二)麸皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性较强的样本(稀释倍数:2倍)
1、4g±0.01g 样品(固体样品需粉碎,并过1mm 分样筛),40mL 水;
2、高速均质1min,或用摇床200r/min~300r/min 剧烈振荡20min;
3、5000r/min离心10min,取上清液备用;
4、取10mL 上样液过免疫亲和柱净化。
(三)酱油、食醋、酱及酱制品(稀释倍数:2倍)
1、称取样品5g(准确到0.1g),用水定容至20mL,混匀,置于超声波/涡旋振荡器或摇床中超声或振荡20min。
3、5000r/min离心10min,取上清液备用;
4、取4mL 上样液过免疫亲和柱净化。
(四)酒类(稀释倍数:2倍)
1、取酒样5g(准确到0.1g),加入1g 聚乙二醇,用水定容至20mL,混匀,置于超声波/涡旋振荡器或摇床中超声或振荡20min;
3、5000r/min离心10min,取上清液备用;
4、取4mL 上样液过免疫亲和柱净化。
(五)婴幼儿米粉(稀释倍数:2倍)
1、5g±0.01g 样品,加入20mL 乙腈-水(8+2);
2、高速均质1min,或用摇床200r/min~300r/min剧烈振荡20min;
3、5000r/min离心10min,取上清液备用;
4、取5mL 混匀后的液体,加入30mL PBS 缓冲液,混匀;
5、取24mL 上样液过免疫亲和柱净化。
十、操作程序:符合国标GB 5009.111-2016
1、连接:将免疫亲和柱后盖取下,用剪刀剪开,重
新盖上,连接于泵流操作架的30mL注射器下;
2、上样:移取上述提取液移至注射器内,打开下端堵头;
3、富集:将空气压力泵与注射器连接,调节压力使样品提取液缓慢通过免疫亲和柱,建议重力过柱;
4、洗涤:用20mL蒸馏水分两次加压清洗,弃去全部流出液,并使2-3mL空气通过柱体;
5、洗脱: 待液体排干后,上样1mL 甲醇,流速1 滴/秒,收集洗脱液,并在50~60℃加热条件下N2 气吹干,然后用1mL 流动相复溶;-复溶液用0.22μm 微孔滤器过滤后转移至样品瓶中用于HPLC或LC-MS 等仪器分析。
十一、操作流程图示
A | B | C | D | E | |||
|
针筒注射器
提取液
过柱 |
泵流加压 |
|
色谱甲醇
|
HPLC | ||
产品信息:
产品名称:呕吐毒素免疫亲和柱
产品货号:LD-003
产品描述:呕吐毒素单克隆抗体
包装单位:25支/盒
储存条件:2~8℃,切勿冷冻
保质期:18个月
本公司可提供的真菌毒素检测产品
类型 | 产品名称 |
ELISA酶联 免疫试剂盒 | 黄曲霉毒素总量(AFT) |
黄曲霉毒素B1(AFB1) | |
黄曲霉毒素M1(AFM1) | |
呕吐毒素(DON) | |
玉米赤霉烯酮(ZEN) | |
伏马毒素(FUM) | |
T-2毒素(T-2) | |
赭曲霉毒素(OTA) | |
免疫亲和柱 | 黄曲霉毒素总量(AFT) |
黄曲霉毒素B1(AFB1) | |
黄曲霉毒素M1(AFM1) | |
呕吐毒素(DON) | |
玉米赤霉烯酮(ZEN) | |
伏马毒素(FUM) | |
T-2毒素(T-2) | |
赭曲霉毒素(OTA) | |
真菌毒素三合一(B1、ZEN、DON)免疫亲和柱 | |
可定制多毒素复合免疫亲和柱 | |
胶体金快速 检测卡 | 黄曲霉毒素总量(AFT) |
黄曲霉毒素B1(AFB1) | |
黄曲霉毒素M1(AFM1) | |
呕吐毒素(DON) | |
玉米赤霉烯酮(ZEN) | |
伏马毒素(FUM) | |
T-2毒素(T-2) | |
赭曲霉毒素(OTA) |