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一、产品用途：
呕吐毒素（DON）免疫层析亲和柱可选择性吸附样品提取液中的呕吐毒素，从而对样品液中的呕吐毒素起到非常针对性的纯化作用，过柱纯化后的样品液纯度被提高，可用于不同分析方法的测定。
二、产品概述：
呕吐毒素主要污染小麦、大麦、玉米等谷类作物，也污染粮食制品，人和动物在误食被该毒素污染的粮谷类后可以产生广泛的毒性效应。它还常与其它的霉菌毒素如黄曲霉毒素共同污染农作物，进入人体后可以相互影响，对人类及动物的健康构成威胁。DON属于剧毒或中等毒物，在体内可能有一定的蓄积，但无特殊的靶器官，具有很强的细胞毒性。
三、反应原理：
呕吐毒素（DON）免疫层析亲和柱测定的原理是抗原、抗体反应，抗体连接在柱体内，样品经过提取、过滤后，缓慢的通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫亲和柱，在免疫亲和柱内毒素与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇洗脱脱氧雪腐镰刀菌烯醇，经氮气吹干复溶后注入到分析仪器中用于检测。
四、产品包装组成：
每盒中包含25支黄曲霉毒素B1免疫亲和柱及1套相应说明书。
五、IAC性能：
1、性能参数
柱容量 | 2000ng |
呕吐毒素 | >90% ±5% |
2、交叉反应率
呕吐毒素 | 100% |
玉米赤霉烯醇 | 1% |
六、注意事项：
1、呕吐毒素可致癌，应戴手套口罩等防护工具操作。
2、使用过的玻璃容器及黄曲霉毒素溶液用5%浓度的次氯酸钠溶液浸泡过夜。
3、不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
4、免疫亲和柱不使用时要2-8℃保存，不可冻存。
5、使用前，免疫亲和柱需回至室温（22-25℃）。
6、取样量：根据实际情况可以适当增减，但不可太少，同时提取液体积要按比例随之改变。
7、pH：上柱液pH要在6~8之间，若偏离此范围需用盐酸或氢氧化钠调节pH。
七、需要的材料但盒中不提供：
设备 | 器皿耗材 | 试剂 |
HPLC 泵流操作架 高速均质器高速粉碎机 | 量筒（50/200mL） 漏斗 收集瓶 容量瓶(100mL/1L) 微量移液器：单道 定量滤纸 玻璃微纤维滤纸 离心管(50mL) | 色谱级甲醇 蒸馏水 乙腈 DON标准品 |
八、试剂配制：
1、磷酸盐缓冲溶液（以下简称PBS）：称取8.00g氯化钠，1.20g磷酸氢二钠，0.20g磷酸二氢钾，0.20gkcl，用900mL蒸馏水溶解，然后用盐酸调节pH值至7.4，后用蒸馏水稀释定容至1000mL。
2、乙腈-水（8+2）：取800mL 乙腈，加入200mL 去离子水。
九、样品处理：真菌毒素分析的大误差来源是样品的收集和取样过程，所以要保证样品收集和取样的代表性。
（一）玉米、小麦、面粉、配合饲料、浓缩料、精补料等吸水性较小的样本（稀释倍数：2倍）
1、5g±0.01g 样品（固体样品需粉碎，并过1mm 分样筛），20mL 水；
2、高速均质1min，或用摇床200r/min～300r/min 剧烈振荡20min；
3、5000r/min离心10min，取上清液备用；
4、取4mL 上样液过免疫亲和柱净化。
（二）麸皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性较强的样本（稀释倍数：2倍）
1、4g±0.01g 样品（固体样品需粉碎，并过1mm 分样筛），40mL 水；
2、高速均质1min，或用摇床200r/min～300r/min 剧烈振荡20min；
3、5000r/min离心10min，取上清液备用；
4、取10mL 上样液过免疫亲和柱净化。
（三）酱油、食醋、酱及酱制品（稀释倍数：2倍）
1、称取样品5g(准确到0.1g)，用水定容至20mL，混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中超声或振荡20min。
3、5000r/min离心10min，取上清液备用；
4、取4mL 上样液过免疫亲和柱净化。
（四）酒类（稀释倍数：2倍）
1、取酒样5g(准确到0.1g)，加入1g 聚乙二醇，用水定容至20mL，混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中超声或振荡20min；
3、5000r/min离心10min，取上清液备用；
4、取4mL 上样液过免疫亲和柱净化。
（五）婴幼儿米粉（稀释倍数：2倍）
1、5g±0.01g 样品，加入20mL 乙腈-水（8+2）；
2、高速均质1min，或用摇床200r/min～300r/min剧烈振荡20min；
3、5000r/min离心10min，取上清液备用；
4、取5mL 混匀后的液体，加入30mL PBS 缓冲液，混匀；
5、取24mL 上样液过免疫亲和柱净化。
十、操作程序：符合国标GB 5009.111-2016
1、连接:将免疫亲和柱后盖取下，用剪刀剪开，重
新盖上，连接于泵流操作架的30mL注射器下；
2、上样:移取上述提取液移至注射器内，打开下端堵头；
3、富集:将空气压力泵与注射器连接，调节压力使样品提取液缓慢通过免疫亲和柱，建议重力过柱；
4、洗涤:用20mL蒸馏水分两次加压清洗，弃去全部流出液，并使2-3mL空气通过柱体；
5、洗脱: 待液体排干后，上样1mL 甲醇，流速1 滴/秒，收集洗脱液，并在50～60℃加热条件下N2 气吹干，然后用1mL 流动相复溶；-复溶液用0.22μm 微孔滤器过滤后转移至样品瓶中用于HPLC或LC-MS 等仪器分析。
十一、操作流程图示
A | B | C | D | E | |||
|
针筒注射器
提取液
过柱 |
|
泵流加压 |
|
|
色谱甲醇
|
HPLC
|
产品信息：
产品名称：呕吐毒素免疫亲和柱
产品货号：LD-003
产品描述：呕吐毒素单克隆抗体
包装单位：25支/盒
储存条件：2～8℃，切勿冷冻
保质期：18个月
本公司可提供的真菌毒素检测产品
类型 | 产品名称 |
ELISA酶联 免疫试剂盒 | 黄曲霉毒素总量（AFT） |
黄曲霉毒素B1（AFB1） | |
黄曲霉毒素M1（AFM1） | |
呕吐毒素（DON） | |
玉米赤霉烯酮（ZEN） | |
伏马毒素（FUM） | |
T-2毒素（T-2） | |
赭曲霉毒素（OTA） | |
免疫亲和柱 | 黄曲霉毒素总量（AFT） |
黄曲霉毒素B1（AFB1） | |
黄曲霉毒素M1（AFM1） | |
呕吐毒素（DON） | |
玉米赤霉烯酮（ZEN） | |
伏马毒素（FUM） | |
T-2毒素（T-2） | |
赭曲霉毒素（OTA） | |
真菌毒素三合一（B1、ZEN、DON）免疫亲和柱 | |
可定制多毒素复合免疫亲和柱 | |
胶体金快速 检测卡 | 黄曲霉毒素总量（AFT） |
黄曲霉毒素B1（AFB1） | |
黄曲霉毒素M1（AFM1） | |
呕吐毒素（DON） | |
玉米赤霉烯酮（ZEN） | |
伏马毒素（FUM） | |
T-2毒素（T-2） | |
赭曲霉毒素（OTA） |
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武经理
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