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别急,赭曲霉毒素免疫亲和柱的操作流程这就送上

点击次数:424次  发布时间:2020-03-02
   赭曲霉毒素免疫亲和柱适用于各类基质复杂样品(各种谷物、各类食品、各种饲料)中玉米赤霉烯酮的靶向精准提取净化。
  赭曲霉毒素A(OTA)具有很强的毒性,是曲霉属和青霉属的真菌形成的次级代谢产物,广泛存在于各种食物,谷物及其副产品中。对人类健康造成极大威胁,因此各国对食品、饲料中赭曲霉毒素A(OTA)含量均有严格*。
  赭曲霉毒素免疫亲和柱的操作流程
  1、取样品适量,粉碎,过20目筛,充分混合;
  2、精密称取20g粉碎样品,4g氯化钠,100mL甲醇-水(70:30);
  3、高速均质约2分钟,或震荡器震荡约30分钟;
  4、过滤样品溶液;
  5、精密取续滤液5mL,加水定容至25mL,充分混匀;
  6、用玻璃纤维滤纸过滤至澄清,精密取澄清续滤液10mL作为待净化液;
  7、将12mLSPE空柱管通过SPE转接头连接于免疫亲和柱上端;
  8、将10mL待净化液以1~2滴/秒的速度通过免疫亲和柱,弃去流出液;
  9、加水淋洗免疫亲和柱和空柱管2次,每次10mL,弃去流出液;
  10、利用真空设备抽干免疫亲和柱1min;
  11、取甲醇1.5mL,加入免疫亲和小柱中,待甲醇缓慢与柱床完全润湿,加压或减压使甲醇缓慢流出小柱,每2~3秒1滴;
  12、收集所有甲醇洗脱液,定容,0.22/0.45µm滤膜滤过后,续滤液上机检测。
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