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三聚氰胺检测卡的工作原理:免疫层析技术与抗原抗体反应
更新时间:2025-07-09 点击量:
53
三聚氰胺检测卡基于竞争抑制免疫层析技术,通过抗原抗体特异性结合实现快速筛查。其核心原理可分为以下步骤:
1.胶体金标记抗体:信号载体与识别元件
检测卡中预先将抗三聚氰胺单克隆抗体与胶体金颗粒(直径20-40nm)结合,形成金标抗体复合物。胶体金颗粒通过静电作用稳定分散,其表面标记的抗体可特异性识别三聚氰胺分子。例如,深圳后王电子科技有限公司的检测卡采用高亲和力单克隆抗体,确保对三聚氰胺的检测灵敏度达0.5mg/kg(液态奶)。
2.硝酸纤维素膜固定抗原:检测线与质控线
在硝酸纤维素膜上,通过喷涂技术固定两条关键线:
检测线(T线):包被三聚氰胺-载体蛋白偶联物(如三聚氰胺与牛血清白蛋白结合),作为竞争结合位点。
质控线(C线):包被抗鼠IgG抗体,用于验证检测流程有效性。
3.竞争反应:样本中的三聚氰胺与固定抗原“争夺”抗体
当样本(如液态奶、奶粉稀释液)滴入加样孔后,通过毛细作用沿膜层析:
阴性样本:不含三聚氰胺时,金标抗体未被结合,继续迁移至T线,与固定偶联物结合形成红色条带;同时,部分金标抗体与C线抗鼠IgG结合,显示第二条红色条带。此时T线和C线均显色,判定为阴性。
阳性样本:含三聚氰胺时,样本中的三聚氰胺与金标抗体结合,封闭其抗原结合位点,阻止其与T线偶联物结合,导致T线不显色;而C线仍显色,验证检测有效。此时仅C线显色,判定为阳性。
4.结果判定与灵敏度控制
灵敏度:通过调整金标抗体浓度、T线偶联物密度及层析速度,实现检测限优化。例如,智云达检测卡对液态奶的检测限为0.5mg/kg,婴儿奶粉为1mg/kg。
无效判定:若C线未显色,无论T线如何,均视为检测卡失效,需重新检测。
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