你想了解的鼠抗微囊藻毒素LR单克隆抗体上线了

　更新时间：2020-05-21 点击量：700

　　微囊藻毒素(MC)是一种环状七肽物质，由古老的原核生物蓝藻代谢释放产生，有80种异构体，对动物和人有强烈的肝毒性，其中常见的MC有MC-LR、MC-RR和MC-YR。目前研究显示水体含量高，毒性大的是MC-LR，能诱发肝癌，近期研究还发现低剂量的MC-LR即能损伤神经细胞、生殖细胞。在淡水水体富营养化的今天，蓝藻爆发事件时有发生，MC污染对人类的健康造成了严重威胁。

　　检测MC-LR的方法主要有物理和化学方法，物理方法主要用于定性和定量测定毒素，依靠的精密仪器，一般价格昂贵、操作繁琐，尚不能国产化；化学方法主要用于监测水体和食物链中MC-LR的水平，可操作性强。本研究着眼于MC-LR的快速、灵敏、定量检测，从反应条件、方法性能等方面评估添加酶联免疫(ELISA)、时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)和纳米均相时间分辨荧光免疫分析法(NH-TRFIA)这三种免疫分析的特点。

　　鼠抗微囊藻毒素LR单克隆抗体利用克隆抗体技术制备抗*型抗体方法相对单抗生产技术简单，容易操作，但如果需要量大，需要多次制备，同时需要除去抗同种型抗体。主要方法是将已生产出的单抗(Ab])直接免疫试验动物，然后提取血清，纯化血清即可。本实验首先利用饱和硫酸铵二步沉淀法初步纯化鼠抗微囊藻毒素LR单克隆抗体，再用G蛋白亲和纯化柱进一步纯化抗体，通过SDS-PAGE电泳实验鉴定纯化*，回收率87.57%。

　　在温和条件下采用木瓜蛋白酶酶切纯化后的鼠抗微囊藻毒素LR单克隆抗体，利用DEAE-52离子交换树脂柱分离抗体酶切片段，获得其抗体的决定簇F(ab")2片段，并对该片段的免疫活性及产率进行测定。结果显示该片段免疫活性降低50%为1:12000但仍然可以作为抗原制备抗*型抗体。然后利用该抗体片段作为新的免疫原，按照常规免疫方法免疫异源受体BalB/C小鼠，获得微囊藻毒素抗*型抗体。

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