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玉米赤霉烯酮偶联抗原(完全抗原、酶标抗原)合成方法技术

点击次数:689  发布时间:2014-04-09

    玉米赤霉烯酮毒素属于类雌激素物质,靶器官为动物的生殖器官。毒素能引起猪只雌激素亢进症,使猪的生殖器官机能和形态发生变化,导致小母猪乳房肿大、乳腺过早成熟、阴道及阴户红肿、阴门外翻、阴道脱出等,呈现霉菌性炎症反应。种公猪睾丸萎缩、性欲下降、精子无活力等。目前,玉米赤霉烯酮的酶联免疫法,免疫胶体金法等检测方法均需要玉米赤霉烯酮抗原抗体。
(1)玉米赤霉烯酮半抗原合成(合成技术路线见下图)
10-20mg玉米赤霉烯酮溶于丙酮中,在碱性溶液中与氯yi酸钠反应,形成含有乙酸基团的玉米赤霉烯酮半抗原。
(2)玉米赤霉烯酮全抗原人工抗原完全抗原酶标抗原)合成
玉米赤霉烯酮半抗原与牛血清白蛋白偶联得到免疫抗原。
玉米赤霉烯酮半抗原用EDC活化,后将100mg蛋白加入0.01mpbs,溶解后与玉米赤霉烯酮半抗原偶联, 室温搅拌1h,用0.01mol/LPBS透析3天,每天换3次透析液,得到玉米赤霉烯酮与牛血清白蛋白的免疫抗原。

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