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呕吐毒素偶联抗原(*抗原、酶标抗原)合成方法技术

 更新时间:2014-04-09    点击量:1368

    呕吐毒素其产毒菌主要是镰刀菌属(Fusarium)的菌侏,其主要污染玉米、小麦、大米、大麦、小米和燕麦等谷物,目前,呕吐毒素的酶联免疫法,免疫胶体金法等检测方法均需要呕吐毒素抗原抗体。
(1)呕吐毒素半抗原合成(合成技术路线见下图)
 20-100mg呕吐毒素,与1-3mol马来酸酐,在2-5ml甲苯中,于80℃搅拌反应,8-20h后,蒸干溶剂,酸化,萃取,重结晶后得到呕吐毒素半抗原。
(2)呕吐毒素全抗原(人工抗原、*抗原、酶标抗原)合成
呕吐毒素半抗原与牛血清白蛋白偶联得到免疫原。
取60mg牛血清白蛋白溶于9.5ml PBS(0.01mol/L,pH5.0)溶液中,加入12.5mgEDC,加入1mlDMF溶解的10mg呕吐毒素半抗原,室温搅拌1h,再加6mg EDC,暗处搅拌反应并过一晚上,用0.01mol/LPBS透析3天,每天换3次透析液,得到呕吐毒素与牛血清白蛋白的免疫抗原。

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