呕吐毒素偶联抗原（*抗原、酶标抗原）合成方法技术

    呕吐毒素其产毒菌主要是镰刀菌属(Fusarium)的菌侏，其主要污染玉米、小麦、大米、大麦、小米和燕麦等谷物，目前，呕吐毒素的酶联免疫法，免疫胶体金法等检测方法均需要呕吐毒素抗原抗体。
（1）呕吐毒素半抗原合成（合成技术路线见下图）
 20-100mg呕吐毒素,与1-3mol马来酸酐，在2-5ml甲苯中，于80℃搅拌反应，8-20h后，蒸干溶剂，酸化，萃取，重结晶后得到呕吐毒素半抗原。
（2）呕吐毒素全抗原（人工抗原、*抗原、酶标抗原）合成
将呕吐毒素半抗原与牛血清白蛋白偶联得到免疫原。
取60mg牛血清白蛋白溶于9.5ml PBS（0.01mol/L,pH5.0）溶液中，加入12.5mgEDC,加入1mlDMF溶解的10mg呕吐毒素半抗原，室温搅拌1h,再加6mg EDC，暗处搅拌反应并过一晚上，用0.01mol/LPBS透析3天，每天换3次透析液，得到呕吐毒素与牛血清白蛋白的免疫抗原。