玉米赤霉烯酮免疫亲和柱的样本处理步骤分析

　　玉米赤霉烯酮免疫亲和柱是玉米赤霉菌的代谢产物，具有类雌激素样作用，具有较强的生殖毒性和致畸作用，可引起动物发生雌激素亢进症，导致动物不孕或流产，对家禽、猪、牛和羊的影响较大，给畜牧业带来很大的经济损失。
 

　　玉米赤霉烯酮免疫亲和柱的样本处理步骤：
 

　　花生，玉米，大米，小麦及其制品和饲料
 

　　1、称取50g粉碎的样品于100mL容量瓶中，加入5.0g氯化钠，以样品提取液定容；
 

　　2、转移至均质杯中，在均质器上高速搅拌，提取2分钟；
 

　　3、4000r/min离心5min或用定量滤纸过滤
 

　　4、取10mL滤液并加入40mLPBS缓冲液稀释，用玻璃微纤维滤纸过滤，取过滤后液体待测；
 

　　5、将免疫亲和柱连接于10.0mL玻璃注射器下。准确移取10.0mL样品提取液注入玻璃注射器；
 

　　6、将空气压力泵与玻璃注射器连接，调节压力使溶液以约1滴/S的流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2~3mL空气通过柱体；
 

　　7、以10.0mL的PBS溶液和去离子水依次淋洗柱子1次，流速约为1滴-2滴/S，弃去全部流出液，并使2mL~3mL空气通过柱体；
 

　　8、准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱，流速为1滴/S，收集全部洗脱液于玻璃试管中，供检测用。