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抗体粗纯化试剂盒的操作程序和结果判断

点击次数:551  发布时间:2019-07-25
 抗体粗纯化试剂盒的操作程序:
    1.洗涤液配制 用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液(2号液)按1:10稀释,如取50ml浓缩液与450ml蒸馏水或去离子水充分混匀即为工作洗涤液。
    2.样本稀释 用样本稀释液(5号液)将待检血清样本按1:100稀释,如取5ul样本与495ul样本稀释液,混匀。阴性、阳性对照品不用稀释,直接加样。
    3.加样反应 每次试验设阴性对照2孔、阳性及空白对照各1孔(分别加入阴性、阳性对照及样本稀释液100ul)。样本检测孔每孔加已稀释血清样本100ul。37℃避光反应30分钟后,甩去孔内液体,每孔注满工作洗涤液洗涤3次,每次均需停留1分钟后再甩净,拍干。
    4.加酶反应 除空白对照孔外,每孔加酶结合物(1号液) 1滴。37℃避光反应30分钟后,甩去孔内液体,如上洗涤,拍干。
    5.显色反应 加底物液(3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37℃避光显色10分钟。加终止液(6号液)1滴,终止反应(加终止液后,蓝色会变为黄色)并判读结果。
抗体粗纯化试剂盒的结果判断:
    以空白对照调零,用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度(A值)。待检样本孔A值大于等于阴性对照A值的3.1倍者判为阳性。如阴性对照A值低于0.1时按0.1计算。
抗体粗纯化试剂盒的注意事项:
    1.抗体粗纯化试剂盒于2-8℃保存,每次使用前应先平衡至室温。
    2.未使用完的板条应密封保存。
    3.抗体粗纯化试剂盒中终止液具有腐蚀性,要小心使用。
    4.瓶盖每次使用后要拧紧,各瓶盖之间不可混用。不同批号抗体粗纯化试剂盒的试剂组份不可混用。
    5.试验样本应为无染菌、无血脂、无溶血的血清或血浆。任何样本都应视为传染源妥善处理。
    6.37℃孵育时,建议使用水浴箱。如无条件,可在温箱中放置湿盒进行反应并同时用不干胶膜封盖板孔。
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